微生物实习报告(推荐3篇)

时间:2022-03-17 00:55:50 作者:网友上传 字数:7149字

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第一篇:篇二微生物实习报告

一、实习时间:2010.6.7-6.12

二、实习地点:食品发酵实验室(化学楼119、123)、食品学院实习基地

三、实习目的:

1、学习自制酸奶的方法,熟悉从酸奶中分离和纯化乳酸菌的一般方法。

2、掌握各类酸奶生产的基本工艺和要求。

3、学习奶酒的发酵过程、工艺流程,及其注意事项。

4、对自己所学的科学知识进一步深化,提高实践能力,整体策划部署能力,动手能力,组织能力,团体协作能力,创新能力等方面也有一些提高。

四、实习内容:

1.酵母菌筛选方案的确定

为了获得最佳酵母菌发酵结果,我们通过对Internet资源以及图书资料的搜索和查寻,查的产酯酵母广泛应用于白酒、黄酒、普通酒、醋、酱油中,另外,还应用于果汁中。

所以我们准备了三种菌种来源材料:果皮、酒曲、保藏的酵母斜面。第一种方法是利用果皮做来源,将削下的果皮放入带玻璃珠的三角瓶充分振摇,梯度稀释,涂布于YPD琼脂培养基上。第二种方法是用各种酒曲做为菌种来源,将酒曲粉碎,称量,梯度稀释,而后涂布于YPD琼脂培养基上。第三种方法是利用保藏的酵母斜面作为菌种来源,用接种环在酵母斜面上取一环菌,而后用划线法接种于YPD琼脂平板上,带用于实验。

经过大家的讨论后,一致决定利用酵母斜面上的菌种,对其进行培养。因为利用酵母斜面上的菌种在此次实习中可以用到我们实验上所学习的知识,真正将知识用于实践,并在实践中得到巩固。但是,酵母斜面上的酵母菌制得的菌悬液浓度很大,所以在菌种筛选方面,我们将菌悬液10进制稀释到10-5,10-6,10-7的数量级,各浓度涂布两个平板,另六个平板用于划线分离法进行菌种分离,30度培养24到48h,观察平板上的菌落生长情况。初选出酵母菌,将菌落照片后就进行显微镜观察,筛选到典型的酵母菌株,进行生化实验。将平板上的酵母单菌落接种保藏于斜面培养基(PDA),30度培养48h后,4度冷藏。将PDA斜面培养基上保存的酵母菌接种于培养液中培养,而后接种于豆芽汁发酵液中,进行发酵测产脂能力。

2.酵母菌的筛选及鉴定

11月25日我们按照讨论决定的方案进行了酵母菌的筛选实验,实验内容如下:

2.1 培养基的制备、分装、灭菌(分述在下文中)

在实习中共需要准备六种培养基:YPD培养基、PDA培养基、豆芽汁培养基、葡萄糖产酸产气培养基、硝酸盐生化实验培养基、糖发酵实验培养基。各培养基配方如下:

1、YPD培养基:1%酵母膏,2%蛋白胨,2%葡萄糖,2%琼脂。

2、PDA培养基:2%马铃薯,2%葡萄糖,22%琼脂。

秤取切成小块的马铃薯,加水煮烂(20-30min),八层纱布过滤,滤液中加入葡萄糖,最后加入琼脂。

3、豆芽汁培养基:10%黄豆芽,2%葡萄糖,2%琼脂

洗净豆芽,加水煮沸30min.用纱布过滤。滤液加入琼脂,加热溶解后放入糖,搅拌使它溶解,补水至设定值。

4、糖产酸产气培养基:营养物(0.5%牛肉膏,1%蛋白胨,0.3%氯化

钠,0.2%磷酸氢钠,0.2%溴麝香草酚蓝)配方为20g/1000ml,蒸馏水配制,pH7.4。分装后加葡萄糖0.5%。

5、硝酸盐生化实验培养基:0.3%牛肉浸膏,0.5%-1%蛋白胨,pH7.0(100ml 培养基加入1g硝酸钾)

6、糖发酵实验培养基:营养物(0.5%牛肉膏,1%蛋白胨,0.3%氯化钠, 0.2%磷酸氢钠,0.2%溴麝香草酚蓝)配方为20g/1000ml,蒸馏水配制,pH7.4。分装后加乳糖0.5%。

制备:由于第6种培养基同第4种培养基,则一组配制即可,再加上无菌水,共需制备六种,则将全班分成六个组,我们为第4组,故配制过程如下:

(1)天平调平。

(2)准确秤取7.8g营养物(配390ml),葡萄糖、蔗糖、乳糖各0.65g。

(3)将营养物放入搪瓷缸中,加入390ml蒸馏水,玻璃棒搅拌将其溶解。

(4)pH试纸测其pH是否为7.4,若不是,用氢氧化钠溶液调到7.4。分装:

(1)取三个250ml锥形瓶,每个锥形瓶中倒入130ml的上述溶液。

(2)将上述称好的葡萄糖、蔗糖、乳糖分别倒入三个锥形瓶中,摇晃锥形瓶使其溶解。

(3)将加入糖的营养液分别装入12个试管中,每个试管用移液管放入10ml。

(4)将每两个葡萄糖、蔗糖、乳糖用牛皮纸扎成一捆,即每6个试管扎成一捆,写上班级、组别后待灭菌。

灭菌:将已经包扎好的试管放入灭菌箱中,进行灭菌待用。

以上就是我们组的制备过程,在这个过程中应该注意以下几点:

1、称量前天平要调平。

2、秤取营养物时应准确秤取。

3、溶解后注意调pH值到7.4

4、量取培养液时要准确,特别是向试管中分装时要用移液管。

2.2 酵母菌的分离(详述分离方法,培养条件及观察到的菌落结果)

步骤过程:

1、倒平板:待YPD培养基冷却至50度左右后,按无菌操作法倒12只平板(每皿约倒15ml),平置,待凝。

2、酵母菌稀释:取1mL菌悬液放入装有99ml的无菌水锥形瓶中,摇匀后再从锥形瓶中取1mL放入1号管,依次进行,则管里酵母的浓度依次是10-2~10-7。

3、平板分离:依次从10-7,10-6,10-5的管里取稀释液进行涂布平板,YPD平板每个浓度涂两个。

4、划线法分离:用接种环从酵母斜面上取一环酵母,在酒精灯前按无菌操作法进行划线,将酵母接种于6个平板中。

5、恒温培养:将12个培养皿平板置于30℃恒温箱中培养24~48小时。 结果:

观察菌落:出现了4种不同形态的菌落。

①圆形,菌落大,表面光滑,湿润,突起,乳白色。

②圆形,菌落略小,湿润,突起,质地均匀,呈乳白色。

③椭圆形,菌落略小,湿润,突起,颜色均一,呈乳白色。

④椭圆形,菌落大,湿润,突起,颜色均一,呈乳白色。

结果分析:

通过网上查阅资料显示,正常条件下大多数酵母菌的菌落特征与细菌相似,但比细菌菌落大而厚,菌落表面光滑、湿润、粘稠,容易挑起,菌落质地均匀,正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一,菌落多为乳白色,少数为红色,个别为黑色。 啤酒酵母的菌落红酵母的菌落各种酵母菌的菌落。

将我们观察的结果与资料相比,确实符合大多数酵母菌的菌落形态。 结论:观察到的是酵母菌落。

2.3酵母菌的初步鉴定(包括革兰氏染色和糖代谢实验)

2.3.1将平板上分离到的各菌株进行简单染色后进行镜检

观察结果为:

球菌,各个细胞的形状比较规整。

结论:

通过菌体个体形态和菌落形态,初步确定出了一株酵母菌。

注意事项:

1、搬动显微镜时应一手握住镜臂,另一手托住底座,镜身保持直立,并紧靠身体,步态稳健。切记单手拎提,以免目镜头从镜筒上掉出而砸坏。

2、各个镜面切忌用手涂抹,以免手上的油、汗污染镜面,造成发霉、腐蚀。

2.3.2 将初步确定的菌株进行生化实验

步骤过程:

用接种环从平板上挑取已分离的.同一菌落接种于糖发酵管和硝酸盐生化管中,接种完后30℃培养。24小时后观察结果。

与此同时,将平板上的酵母单菌落接种保藏于斜面培养基(PDA),30度培养48小时后,4度冷藏,待检其他特性。

结果:

验中并没有观察到,但硝酸盐管中变黄,则分析结果,可能是酵母菌生长不旺盛,导致即使产气也看不出来。

根据这一现象,能够说明该菌株具有产酸产气性能,确定此菌株确实是酵母菌。

3、发酵产酯实验(11.23-11.24)

步骤过程:

(1)准确吸取25ml发酵液于250ml锥形瓶中,加入25ml蒸馏水,滴2滴酚酞指示剂,用0.1mol/L的氢氧化钠滴至微红色,记下消耗氢氧化钠溶液的体积。

(2)将滴定后的发酵液转移至250ml锥形瓶中,准确加入15ml上述氢氧化钠标液,接上冷凝管,加热至沸回流30min。

(3)取下冷却至室温,完全转移至250ml碘量瓶中立即用0.1mol/L的盐酸溶液滴定至微红色刚好消失,纪录盐酸溶液的用量,记录总酯的含量。 结果:

氢氧化钠消耗体积:V1=1.9ml

盐酸消耗体积:V2>15ml

分析与结论:氢氧化钠消耗体积1.9ml用来预估总酯含量,且其越大则总酯越少。由此可见,产酯量应该不少。

按公式:总酯=(15-V2) X0.1X10-3mol 但是我们滴到18ml仍不见结果,并且没有要到微红的迹象。可能是由于配制实验试剂时出现问题,导致没有测出总酯量。

五、总结

短短一周的微生物实习在紧张又有效率的节奏下顺利的结束了。这是我们自己在老师协助下并亲自动手连续完成的一些列实验,在其中感受到了很多平时和课上很少遇到的东西,有自主,有探索,有反思,有合作

短暂的实习转眼而过,回顾实习生活,我在实习的过程中,既有收获的喜悦,也有一些遗憾。喜悦是我们都在老师的指导下自主设计了方案并分工鲜明,合理掌握每一步实验用时及时、准确测量数据,最终都得到了相应的结果。而遗憾那就是对实验有些方面的认识仅仅停留在表面,只是在看人做,听人讲如何做,未能够亲身感受、具体处理一些工作,所以未能领会其精髓。但时通过实习,加深了我对实验和微生物基本知识的理解,丰富了我的微生物实验的知识,使我对实验有了深层次的感性和理性认识。认识到要做好实验,既要注重理论知识的学习,更重要的是要把实践与理论两者紧密相结合。更进一步体会到了“实践是最好的老师”的深刻意义。

篇三:微生物实习总结

岁月如梭,光阴似箭,不知不觉在微生物室实习的时间已经结束了,但收获颇丰。 通过积极协助老师完成细菌学方面检验项目的同时,自己的基础操作能力有了很大程度的提高,操作起来熟练了非常多。而且通过染色在显微镜下能辨认的细菌也更多了,像球菌科的葡萄球菌感染、链球菌、淋球菌以及杆菌科的肠杆菌,真菌孢子在显微镜下也能一眼辨认;全片查找结核杆菌的阳性率也提高了。

对什么类型的标本应做什么平板接种,培养温度等也有了进一步的掌握,比如:痰标本应接种在血平板,巧克力平板,沙保平板而且还要做涂片染色以监测痰标本的合格程度。血平板和巧克力平板主要观察病人痰标本里的基础菌群的生长状态,沙保主要观察是否有念珠菌生长。

总之在微生物一个月的实习日子里感觉自己受教颇多,通过亲身实践操作把自己在学校学到的理论知识同实践很好的结合了起来,在带教老师的悉心指导下已熟悉掌握了各类标本的接种、细菌培养以及细菌的初步鉴定、细菌的药敏试验等。

第二篇:微生物实验室实习报告

微生物实验室实习报告

在这次见习中,我和其他三位同学被一起分到了微生物科。在微生物科负责我们见习工作的是一位韩老师,他为人很随和,给我们布置的见习任务就是每个人跟踪一种类型的临床标本。他要求跟踪从标本被送到微生物科开始一直到得出最终的报告为止并把从中的所见所得记录下来,通过这样一个过程让我们能够对微生物科有尽可能多的了解。除此之外,韩老师还让我们了解一下里面的一些大型自动化仪器的用途及操作方法,为我们以后能更快的适应实习做准备。

见习的第一天,我们看的是标本的接种,我们看过那里的老师熟练的接种过程后深感自己平时做实验室的速度是如此之慢,如果以我们这种速度去完成每天要接种上百个标本的临床工作是根本不可能的。此外我们还看了临床上的革兰染色,发现它与我们做实验时有一些不同,主要区别是在染料上,临床上为了提高染色速度都用了快速染料。总之,这一天的见习让我们了解到的就是效率在临床上是十分重要的。见习的第二、第三天,我们看的是临床标本的鉴定,对某些细菌,临床上有经验的老师只要通过观察菌落特征、气味及其他一些简单物理性状就可以初步判断出是何种细菌,让我们大感吃惊。科室里还有一位很热心的老师在她空闲的时候向我们详细的讲解了一番在临床上一些常见微生物的鉴定方法,听过之后让我们受益匪浅。

见习的第四天,我们看的是临床标本的药敏反应。在这一天里,我们详细的`了解了临床上是如何做药敏反应的,以及不同的微生物需要做哪些药敏反应,这些都是我们在课堂上所无法学到的宝贵知识。最后一天,我们看的是微生物科是如何做质控的。通过这一天的见习,使我们深刻了解到质控对于检验科的重要性。之前,我们只是从书本上了解到其对于检验这一学科是很重要的,但是无法有深切的体会,这次见习给了我们一次很好的机会能让我们在实践中认识到它。除了这些以外,我们每天还在科室里老师有空的时候让他们给我们讲解了一番微生物科中各种孵育箱的作用、ATB仪器的操作方法及其他一些仪器的用途和操作方法,让我们对微生物科有了更全面的了解。

五天的时间眨眼就过去了,我的见习也在不知不觉中圆满结束了,能学到的东西却比我们在学校一个月学到的还多。回想这段时间的生活,我觉得自己过的很充实,也很快乐,更重要的是我学到了不少东西。我相信,这段时间的收获将是我人生中的一笔宝贵的财富。我也相信,通过这次见习的锻炼,将帮助我能更快的融入到即将到来的实习生活中以及以后的工作中。

第三篇:兽医微生物实习报告

一.实习目的

为了使学生能够理论联系实际,通过亲自实地解剖感染小鼠,对小鼠的心、肝、脾进行麦康凯琼脂平板划线培养,以柯赫法则为这次实习的主线,达到鉴定出小鼠感染的菌种的目的,熟练运用微生物实验课的所涉及的实验操作和方法,提高实验动手能力,分析实验过程中可能出现的问题,并解决问题。特开设微生物教学实习,掌握基本技能,加深理论部分的理解,能够独立诊断出传染病病菌,获得严谨的科学实验素养。

二.实习材料

实验动物:一只被感染小鼠,一只健康小鼠

实验器械,主要包括:小鼠解剖工具手术剪、镊子、蜡盘、钉子,接种棒、酒精灯、打火机、记号笔、手套、载玻片、枪头、注射器、离心管。

实验材料:麦康凯琼脂平板、各种染色液(结晶紫溶液、碘溶液、酒精、沙黄水)、蒸馏水、培养基(普通肉汤培养基、蛋白胨培养基、葡萄糖蛋白胨培养基、固体培养基)、PBS重悬液、生化试验材料(微量发酵管(葡、乳、枸、尿素、麦、甘醇、蔗、硫)、对二甲基氨基苯甲醛、乙醚、甲基红、vp甲乙液)。

实验主要仪器:离心机,分光光度器,温箱,摇床,超净工作台

三.实习内容

以柯赫法则为主线,通过对感染小鼠的剖解采样、分离培养、镜检、扩增培养,然后把得到的纯培养物对健康小鼠进行再次接种以获得被感染小鼠,再次重复以上操作,把获得的纯培养物通过镜检观察和做生化实验来鉴定出感染小鼠的致病菌。

四.实习操作进程

第一天:实验设计、讨论症状、分离剖解

1 实验设计:以小组为单位进行实验设计,明确此次实验主要法则是:柯赫法则。在老师的指导下确定此次实习的主要步骤,讨论实验中可能遇到的问题以及注意事项。

2 讨论症状:比较观察健康小鼠与病鼠,可见到病鼠一般呈萎靡状,不活跃。每组领取一只感染小鼠观察症状,体表基本正常。

3 分离剖解:先将麦康凯琼脂平板分三区,依次写上肝、脾、心。右手抓起小鼠尾巴,将小鼠摇晕,采用颈椎脱臼法将小鼠处死。将小鼠尸体仰卧固定于蜡盘上,充分露出胸腹部。先用小鼠腹部柔软部用剪刀剪一小口,然后从该小口处往上、往下剪将皮毛剥离,剥离腹膜暴露出肝脏和脾,可观察到有轻微的肝肿胀,颜色变淡。将肝和脾切开一小口,用接种环取样,在麦康凯琼脂平板的相应区域进行划线分离。再打开胸腔观察,可见胸腔有出血现象和凝血块,剪开心包膜,将心脏切一小口,用接种环取样,在麦康凯琼脂平板的相应区域进行划线分离。写上班级组别,日期,置于温箱中培养至第二天早上8点。

第二天:挑取单菌落,镜检,扩增培养,重悬,测OD配浓度,小鼠腹腔注射

1 挑取单菌落:观察麦康凯琼脂平板上菌落的形态为圆形,边缘整齐,表面光滑,暗红色,圆心处颜色较边缘浅。挑去单个菌落,画上记号准备做后续试验。

2 镜检:选取所挑选菌落的一半进行抹片。取干净玻片,滴半滴去离子水,用接种环挑取菌进行抹片、干燥固定、采用格兰染色法染色:草酸铵结晶紫染色1-2’,水洗,革兰氏碘液媒染1-2’,水洗,95%酒精脱色约30’’-1’,水洗,沙黄水溶液复染10 ’ ’-30 ’ ’,水洗。吸干,镜检。观察到该菌被染成红色,是格兰阴性菌。

3 扩增培养:选取剩余的菌接种到肉汤培养基中,置于温箱培养9个小时至菌的生长对数期。 4 重悬测OD值配浓度:下午5点左右,将培养的菌转入无菌小管中离心,离心后可见菌沉

于管底,在超净工作台内操作,去上清液,用枪头吸取PBS液至去了上清液的菌管中,反复吹打使其重悬,然后再次离心,去上清,重悬,通过分光光度计测得OD590的值,配成2*10^7CFU浓度的菌液。

5 小鼠腹腔注射:每组挑选一只健康小鼠,在头部或尾部做上记号,用右手抓住鼠尾,将其摇晕

,令其前爪抓住铁丝盖上,然后用左手的拇指和食指捏住小鼠头颈部皮肤,并翻转左后使其腹部朝上,将其尾巴夹在左手掌与小指之间,右手把持注射器吸取2mL菌液,在股后侧面插入针头,先刺入皮下,后进入腹腔,注射时阻力,皮肤也无泡隆起。注射完将小鼠放回鼠笼即可。

第三天:观察小鼠发病情况

小组成员分时间段观察小鼠感染情况,见小鼠濒死的尽快解剖接种分离致病菌。若 一整天未见小鼠有异常情况的等第二天解剖

第四天:剖解划线培养

虽然小鼠未见萎靡,由于预订的感染时间差不多,可以进行解剖接种第一天的操作,

可见体表有淤血点,剖开的小鼠肝脏流出大量的血液。其余均同第一天的操作,将麦康凯琼脂平板的上所接的菌置于温箱中培养。

第五天:生化鉴定

观察到平板上只有一个较小的暗红色菌落,挑取该菌落进行扩增培养9小时至细菌生长的对数期。下午6点观察,培养液依旧是澄清的,很可能没有长菌。为做进一步的验证,进行生化试验。将该菌接入微量发酵管()和蛋白胨以及葡萄糖蛋白胨中,培养至第二天看结果。

第六天:观察结果,整理报告

生化试验无任何反应,说明接的菌为杂菌或污物,整理实验报告并分析失败原因。

六.实验结果与分析

此次试验失败

给小鼠攻毒,未能分离出致病菌,因此也无法鉴定出小鼠被感染的病原菌为何种肠杆菌科

试验失败原因可能有:

1、接种棒火焰消毒后,等待冷却的时间过短,接种棒接种菌时将菌烫死

2、由于小鼠的免疫力强,使得感染小鼠的病原菌被免疫掉了,因此未接种到治病菌

3.给小鼠注射的量或浓度还不够未能达到使小鼠感染的目的

4、在第一次从小鼠体内分离出来的菌可能不是致病菌,或者麦康凯琼脂平板上培养出来的 菌落不止一种,而我们挑选到的某一菌落恰好不是致病菌。

5、在进行腹腔注射时,可能没有注射到腹腔,而只注射到皮下,或者其它部位。

6、采样时可能由于接种环未完全伸入到心、肝、脾的组织中,或者伸到的组织里 恰好没有致病菌

7、可能由于小鼠感染的时间过短,还未达到菌生长曲线的高峰期

七.思考与总结

1 此次试验失败的原因有很多在我看来最有可能的原因有以下几点:

(1) 小鼠免疫:由于这些小鼠是实验室的小鼠,长期被用来做各种致病菌的实验,使得它们获得一定的免疫,所以虽然注射了足够使小鼠感染发病的剂量,但也被小鼠免疫掉了,而无法从小鼠体内获得病料。

(2) 病料不够:从学姐那了解到,她们做攻毒实验的动物,都是将整个组织块磨碎以后,再接到培养基上,而我们做实验是只是用接种棒挑取一点,接种棒上粘到的病料比较少或根本没有,因此培养不出菌。

(3) 挑取的单菌落未必是致病菌:由于平板上长出可能不止一种菌,因此挑到的单菌落,未必是致病菌。

2为什么扩增出来的菌不直接注射小鼠,而要经过离心?

因为菌可能会产生毒素,若直接注射可能就无法判断使小鼠发病的到底是毒素作用,还是因为病菌在小鼠体内繁殖感染而造成的。

3 肠杆菌科有哪些,特征有哪些?

学生自我鉴定:

2011年5月16号到21号期间进行了维持一周的微生物实习,在微生物实习期间,我能够做到主动和小组成员交流、合作、解决问题,认真完成实验操作,学会灵活运用自己的专业知识解决问题。

通过这段时期的实习,我们对无菌操作有了进一步的理解,掌握了仪器操作的基本技能,巩固了理论部分的知识,也了解到公共卫生意识的重要性。

实习不过短短的五天,在这短暂的五天内,,我们有过发现时的喜悦,有过解剖小鼠时的紧张,有过培养不出菌时的困惑,但最终我们收获了知识,也收获了友谊,在合作中共同进步,在困难中共同进退,一切的困难便能迎刃而解。

这次微生物实习为我们专业的继续拓展提供了宝贵的经验,为动物医学本科专业的我们学习后续课程奠定扎实的基础。

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